�����ڵ�λ�ã� › ���������ȵ�ר����ҵר���߿Ƽ���ҵ
���\��ҩ��ļ����о���չ

2011-12-16

 

ժҪ�����\��ҩ�﷢չѸ�٣��������ִ��Ƽ���ҽ��������ҵ��ʵ��Ӧ�ý�չ�����IJ��������\��ҩ������·�չ״���ͷ�չ���ơ�

�ؼ��ʣ����\��ҩ����ͣ���չ

���\��ҩ����ָ�������\���ֶ��������õ�ҩ��������򹤳�ҩ��ͻ���ҩ�Ŀǰ������оƬ����������������ʵ��Ͷ�ʽ�����������ǰ���з��׶Σ���δʵ�־������⣬�������\���������ʵ�־����棬���л��򹤳�ҩ�������ۼ�ʵ�ֵľ�������ߣ���������������ռ��63%���г��ݶ��ͳ��ҩ����Ҫ�ǻ�ѧС���ӣ��������öȽϺã����ִ��Ļ���ҩ��͵�����ҩ���������������ӣ���͸�����͡���ˣ��������\��ҩ��ķ�չ��������о�����ü�ޡ�

1  ���򹤳�ҩ��ļ����о�

1��1  ����

���򹤳�ҩ����ָ�����ִ����\���������DNA���鼼�������������¼���������ijЩ΢���ֲ����������������ҩƷ��Ŀǰ�ٴ�ʹ�õĻ��򹤳�ҩ�����Ҫ���;�Ϊ��Һ��ע����Ͷ��ɷ����������Ϊ���ﵰ�ף����ڼ��ױ�����ø���⣬���跴��ע���ҩ�����ٴ������˲����㡣�Ի��򹤳�ҩ����м��͸��죬�ֽ׶��ձ��������ɽ���߷��Ӳ��϶�ҩ����а���������ǿ���ȶ��Բ��ﵽ���ͻ��͵�Ч��[1]�����⻹�ɽ����Ͻ��а��������ζ�ʹҩ����а����ԡ�

1��2  ����֬���塢�����ҡ�������͹��������

����֬���塢�����ҡ�������ͨ���ɾ����ᡢ�۱�����-�ҽ������Ǿ��ǡ�����������ɽ���߷��Ӳ��ϰ���ҩ����γɸ�������������100 nm�Ľ�������������ײ��ϵ����ԡ�����ɽ�����Ͽ������ڿڷ�������ע��ͼ���ע�䣬������ɽ������ֻ�����ڿڷ����ۺ��コ���ǽ��������ڷ�չ��һ�������������塣����Ƕ�ι�������ˮ������Ҫ�Ǿ��Ҷ�������ˮ�����þ�����ϩ���۱���ϩ���۰����ἰ�ۼ������Ⱦ����࣬��������Ҷ���һ�𹹳����Ծۺ��

1��3  ���������ü���

����������I�ͽ�ԭ���ס����Գ���άϸ���������ӣ�acid fibro-blast growth factor��aFGF��Ϊ��Ҫԭ���Ʊ����Գ���άϸ���������Ӹ��Ͻ�ԭ������[2]����aFGF���Ƴ�50��g��mL����Һ�����˳��������Ʊ���I�ͽ�ԭ������Һ��0��05 mol��L��NaH��Һ��pH��6��Ȼ����aFGF��Һ����1��1����Ȼ�ϣ�����ģ���У������䶳����ɺ����壬����aFGF��ԭ���ࡣ�ٽ������ﰲȫ���������飬�������Զ������顢�̼������顢�������顢��Ѫ�����顢ϸ�����������Լ�����������ֲ���飬���֤����aFGF��ԭ����Ķ���ѧ�������������ԣ����ø���ֲ������δ���쳣��Ӧ��8���ڽ��⣻���ٴ���ѡȡ�����Դ����������֤���ٴ�Ӧ�þ��дٽ��������ϡ���ֹ��Һ�����Ч����

2  ����ҩ���ҩ�����ϵͳ�о�

2��1  ����

����ҩ���ǽ����ƻ���ӵ�������Dz������������������ڽ������Ƶ�ҩ�����ҩ����о�����Թ��ܻ�����ͻ���ת¼�� mRNA�������������������쳣�����²������Լ���Դ�²�΢���������л������ơ��������ҩ���Ƽ��о���ʼ��20����70������ڣ��ӵ�һ���������ҩ��Vitrovene��1998���1999�������������ŷ������131������Ŀǰȫ�����н�30��ҩ������Ʒ��������ٴ����顣

Verma[4]ǿ�����������ƵĹؼ����ڻ������ϵͳ��Ŀǰ���㷺ʹ�õĻ������ϵͳ�ɷ�Ϊ������Dz����������ϵͳ�������������ϵͳ��תȾ�ʸߣ�������Ұ���͸�Ⱦ����������������Ļ��������»��������¼���ʹ�����ǶԲ����������ϵͳ��ѡ��������ء���ˣ��Dz����������ϵͳ��δ���ķ�չ���򡣵�һ��Dz�������תȾЧ�ʵͣ���Ϊ����ҩ����������ұ�������硢��ˮ�Թ�ǿ������ͨ��ϸ��Ĥ[5]�����ױ�����ø���⡣�����ȶ��ġ�����һ����ˮ����ƽ�⡢͸���Ժã�������ֱ�Ӱ���ķDz�������ҩ�����壬���ڸ��ƻ���ҩ��������Ϊ�ؼ���

2��2  ����鵼�����ԷDz����������ϵͳ

�������ڰ�������弰������������ϸ����Ӧ��ϵ����1���������Ļ����ǻ���ͨ������鵼������;����receptor mediated endocytosis������ϸ��������ȥ��Һ���ǵ���������и��׺�������˶ԷDz���������ǻ��������ڻ�������������о��϶࣬����п���ǰ����


1���ǻ������ε�������֬����������ϵͳ

������֬����ͨ����1����һ�����������׻������1�����Ը���֬��ɣ�ǰ���ֳ�Ϊϸ��תȾ�أ�cytofectin������������֬����Ļ������ĺ͹ؼ���λ��ϸ��תȾ�صĻ����ṹ��1��������ɵ�ͷ���ţ���ˮ���ţ�������1����ˮ�����ϣ�ͷ����һ���Ǵ���1�������������ij���������ţ���ˮ��������Ҫ��֬�������͵��̴������ࡣ���Ի���Ը���֬��colipid����֮��ϵ�Ŀ�����ȶ�˫��Ĥ�ͽ������ԳɷֵĶ��ԣ����ж�������֬���Ҵ�����Ӧ������������֬��Hara��[6]������ȥ��Һ��֬�򵰰������ε�֬����DNA�������ͨ��ȥ��Һ���ǵ�������鵼������;�������������ĸ�ʵ��ϸ����ȡ������Ԥ�ȸ����Ҷ�����������ž���ע���ҩ�ķ������������ڸ�������ǿ��

������������֬����������ȥ��Һ���ǵ��׷dz��������õ���Է����������ǻ��������ǻ������Σ��������Ҽ���������ԭ�ԣ����и�������ơ�Mitsuru��[7]�ڴ˻����Ϻϳ���һϵ�����͵��̴�����������������������ɣ�����DNA��ϣ������ǻ����¶�ǻ���ͨ��ȥ��Һ���ǵ���������¶����������ڸ�ʵ��ϸ����ξ���ϸ�������ڷβ���һëϸѪ�ܴ���the first capihary bed���Ľ���ЧӦ��δ���ǻ����ε�֬������Ҫ�ڷβ�����Ŀ����֯��ȡ�����ǻ������ε�����֬�����ͨ������鵼������;���ڸ�ʵ��ϸ�������ϸ���о����нϸߵ���ȡ�ʼ�תȾ���ԣ��Ҷ�ϸ���Ķ��Խϵ͡�

2���ǻ������ε������Ӿ۰�����������ϵͳ

Ŀǰ�������ᣨpoly -lysine��PLL�����㷺��������ĹǼܡ������Ӿ��������������ijɷ�ͨ�������ϣ�����DNA�����Ե�ͬʱЯ����͸Ĥ���γɸ�����󣬽����ǻ������Σ����ܽ�������鵼�İ��������ơ�����ϸ���������Ƥ�����������壨EGFR����ת���������塢Ҷ����������ȱ��[8-9]����˿�ͨ�������������ʵ�����ԷDz����������ϵͳ�������Σ���ʵ������ϸ���İ������ơ��������������Ƥ�����������������Կ���ͨ����ѧ����Ͽ��γ����������������Ƶİ���������[10]��

3���ǻ����Ǿ��ǻ������ϵͳ

�Ǿ����Ǽ׿��ද���еļ׿�������������õ��Ķ��������ʣ���Ϊ�����ҩϵͳ������ص��ǰ�ȫ�Ըߡ�������ԭ�ԡ�����ɽ��⡣ͨ���ԿǾ��ǽ����ǻ������Σ��������תȾЧ�ʡ��Ǿ��ǵ���Է���������Ӱ�����ӵĴ�С����������ȶ��Ժ�תȾ�ʡ����Ǿ��ǵ���Է�������Ϊ40 000ʱ���������תȾ�ʽϸߡ�

4�����к˶�λ�źŵķDz����������ϵͳ

����ҩ�ᆳ��Ĥ����鵼���������̽���ϸ���ʺ�����Ŀ����Ҫ����ϸ���˽��л�������ص�У�����Ӷ��ﵽ����Ŀ�ġ�ϸ�����ھ�ֹ״̬ʱ����Ĥ�ǻ����˺˵���Ҫ���ϡ��˿׸�����Ŀ׾�һ��Ϊ9nm����Է�������С��20000��40 000������С��9nm�����ʿ�ͨ��������ɢ������ڣ���������������Ҫͨ���˿׸����nuclear proe complexes������ת������ڡ��ں˶�λ�źţ�nuclear localization signals���鵼������ת�˹����У��˿׸�����Ŀ׾������ӵ�26 nm[11]��ֵ��ע����ǣ����˶�λ�ź���Dz�������������������Ӳ�������߻����תȾЧ�ʣ�˵���˶�λ�źŵ������ڰ��ڶ���ϸ��Ĥ���档Tachibana��[12]ͨ�����Ӻ˶�λ�źţ��ѳɹ��ؽ�ţѪ��׵��װ�����ϸ���ˡ�

2��3  ����鵼�����ԷDz����������ϵͳ�����ӵ����������

�����Dz�����������ʹ����������������γɱ��������ɵĸ������ѪҺ�п�����������Ե�����Ͷ������ã���˶�������������ӽ��е������Ҳ�Ե�ʮ����Ҫ�����о����ġ�Ч����õ����Ծ��Ҷ������е����Ρ����Ҷ���Ϊһ������Զ��������DNA���������������ε����帴������нṹ���Σ��ɽ��ͻ����θ����������ĵ���ԡ����Ʊ�����ѷ���Ϊ���Ƚ��������������ν�Ͼ��Ҷ�����Ȼ�󽫾��Ҷ�������ѡ�õķDz���������й��۽�ϣ��γ����-���Ҷ���-���帴��������DNAŨ���γɸ�����÷��������������ɸ����١������׵��γɾ��Ҷ������ε�DNA������[13]��

�ο����ף�

[1] Rafati H��Coombes AGA. Protein loaded poly��DL-lactide-co-glycolide��microparticles for oral administration��formula-tion��structural and release characteristics[J]��Journal of Controlled Release��1997��43��1����89��

[2] Ҷ���ã��޺��࣬��������ȣ����Գ���άϸ���������Ӹ��Ͻ�ԭ������Ʊ�������Ч�۲�[J]��ҩ�����\����2005��12��3����171-174��

[3] Mulamba GB��Hu A��Azad RF��et al��Human cytomegalovirus mutant with sequence-dependent resistance to the phosphorothioate oligonucleotide fomivirsen[J]��Antimi-crob Agents Chenother��1998��42��4����971-973��

[4] Verma I��Gene therapy-promises��problems and prospects[J]��Nature��1997��389��6 648����239��

[5] Ross PC��Hui SW��Lipoplex size is a major determinant of in vitro I-ipofection efficiency[J]. Gene Ther��1999��6��4����651��

[6] Hara T��Aramaki Y��Takada S��et al. Receptor mediated transfer of pSV2CAT DNA to mouseliver cells using asialofetuin-labeled lipo-somes[J]��Gene Ther��1995��2��10����784-788��

[7] Mitsuru H��Makiya NK��Fumiyoshi YS��Cell specific delivery of Genes with glycosylated carriers[J]��Adv Drug Del Rev��2001��52��3����187��

[8] Joseph AR��Philip SL. Enhanced folate receptor mediated gene therapy using a novel pH-sensitive lipid formulation[J]��Control Rel��2000��64��1-3����27-37.

[9] Wojda U�� Goldsmith P��Miller JL��Surface membrane biotinylation efficiently mediates the endocytosis of avidin bioconjugates into nucleated cells[J]. Bioconjug Chem��1999��10��6����1 044��

[10] Bassima A��Laurent S��Barbara A��Non-viral gene transfer��application in developmental biology and gene therapy[J]��Biol cell��1995��85��1��

[11] Hideyoshi HS��Yasuo SH��Hiroshi KD��Intracellular control of gene trafficking using liposomes as drug carriers[J]��Eur J Pharm Sci��2001��13��85.

[12] Tachibana R��Harashima H��Shono M��Intracellular regulation of macro-molecules using pH-sensitive liposomes and nuclear locationsignal��quantitative and qualitative evaluation of intracellular trafficking[J]��Biochem Biochys Res Commun��1998��251��538��

[13] Manfred O��Greg W��Thomas B��Tumor-targeted gene therapv��strategies for the preparation of ligand-polyethylene glycol-polye-hylenimine��DNA complexes[J]��Control Rel��2003��91��173.

 

��Դ��¼��    ���й�ҩҵ��